SN/T 5228.9-2019 出口食品中病原微生物快速筛选方法 MALDI-TOF MS法 第9部分:铜绿假单胞菌

标准编号:SN/T 5228.9-2019

标准名称:出口食品中病原微生物快速筛选方法 MALDI-TOF MS法 第9部分:铜绿假单胞菌

英文名称:

中国标准分类号(CCS):C53

国际标准分类号(ICS):67.050

发布部门:海关总署

起草单位:中国检验检疫科学研究院、伊宁海关、库尔勒海关等

标准状态:现行

发布日期:2019-12-27

实施日期:2020-07-01

标准简介:

为了保护实验室人员的安全,应由具备资格的工作人员检测铜绿假单胞菌,所有培养物和废弃物应参照GB19489中的有关规定执行

部分内容展示:

8.2样品制备、增菌培养
称取25g样品至盛有225 mL SCDLP的无菌均质杯内,8000rmin-10000rmin均质1min-2min,或放入盛有225 mL SCDLP无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min-2min。若样品为液态,吸取25
mnL样品至盛有25 mL SCDLP的无菌锥形瓶(瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠)中,振荡混匀。于36℃±1℃培养18h-24h
8.3分离
将增菌后的培养物,划线接种于十六烷基三甲基溴化铵培养基(6.3)上,于36℃±1℃培养18
h-~24h。铜绿假单胞菌在十六烷基三甲基溴化铵培养基(6.3)上菌落扁平无定型,向周边扩散或略有蔓延,表面湿润,菌落呈灰白色,菌落周围培养基常扩散有水溶性色素。
84可疑菌落的处理
841接种培养
至少应挑取5个可疑菌落,划线接种BHIA(6.1)培养基上,30℃1℃培养18h-24h。如果平板上的可疑菌落少于5个,则应全部挑取。
8.42菌落蛋白提取
8421取适量细菌培养物(5mg~10mg),将细菌细胞重悬于300μ水中,充分混匀;加入900uL无水乙醇(65),涡旋振荡混匀;1300离心2m,弃上清,相同条件瞬时离心30s,用移液器移除剩余上清液,室温放置5min,使乙醇挥发
842.2加人30μ~50μ70%甲酸(6.6)(甲酸的量可以根据细菌沉淀的量进行调整),充分混匀加入等体积乙腈(64),涡旋振荡混匀;13000g,离心2min,上清液用于点样

博创标准pdf下载网
博创标准下载网 » SN/T 5228.9-2019 出口食品中病原微生物快速筛选方法 MALDI-TOF MS法 第9部分:铜绿假单胞菌

发表评论

提供最优质的资源集合

立即查看 了解详情