SN/T 5334.5-2020 转基因植物产品的数字PCR检测方法 第5部分:转基因棉花

标准编号:SN/T 5334.5-2020

标准名称:转基因植物产品的数字PCR检测方法 第5部分:转基因棉花

英文名称:

中国标准分类号(CCS):B16

国际标准分类号(ICS):65.020.01

发布部门:海关总署

起草单位:中国检科院、上海海关等

标准状态:现行

发布日期:2020-12-30

实施日期:2021-07-01

标准简介:

本文件规定了GHB119、T304-40、GHB614、LLCotton25、MON1445、MON15985-7、MON88913等个转基因棉花品系的转化事件特异性数字PCR检测方法。
本文件适用于棉籽、棉籽粕、棉花叶子中上述7个转基因棉花品系的检测。本文件的定量检测下限为40pg(约20拷贝)棉花基因组DNA或0.1%(ww)含量转基因棉花品系成分。

部分内容展示:

63数字PCR反应程序
根据仪器要求,将配制好的数字PCR反应混合液,加入微反应体系生成装置的加样孔中,按仪器操作说明生成微反应体系。将微反应体系放置于PCR扩增仪中,按以下参数进行PCR扩增:95℃,
5min(1℃/s),1个循环;94℃,15s,59℃,1min(1℃/s),40个循环;98℃10min(1℃/s),
1个循环;12℃保存反应产物。对微反应体系进行荧光检测,记录阳性和阴性微反应体系数量及其比值。根据比值分别计算数字PCR反应体系中的Adhe基因拷贝数(copies{uL)和品系特异性序列拷贝数(copies{uL)
注:PCR反应参数可根据基因扩增仪型号的不同进行适当的调整。

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